Тонкослойная хроматография. Применение в фармацииМатериалы / Тонкослойная хроматография. Применение в фармацииСтраница 12
Нами изучался флавоноидный состав в отдельных видах рода чина: ч.посевная (I), члуговая (II), ч.весенняя (III), ч.лесная (IV).
С целью возможного использования липидного комплекса в пищевых добавках и лекарственных препаратах нами также изучался полный фракционный состав липидов в траве и семенах чины.
Материалы и методы
Выделение липидной фракции из сухого сырья проводили по методу Блая и Дайера.
К навеске (0,2 г) сухого растительного сырья добавляли 1,6 мл дистиллированной воды и выдерживали в течение суток на холоду. Затем добавляли 6 мл смеси хлороформ — метанол (1 :2) и оставляли на 3 суток, после чего центрифугировали при 8 тыс. об/мин — 15 мин. К прозрачному супернатанту добавляли 2 мл воды и 2 мл хлороформа. Образовавшуюся 2-х фазную систему разделяли в делительной воронке. Хлороформный слой дважды промывался метанолом и упаривался досуха на роторном испарителе. Остаток сушили в вакуум-эксикаторе, затем разбавляли хлороформом до концентрации 10 мг/мл и раствор хранили в стабилизированном хлороформе при + 4°С.
Качественный анализ липидной фракции проводили с использованием метода ТСХ на пластинах Кизельгель 60 (254) в следующих системах растворителей:
А. Для нейтральных липидов: 1) Гексан — бензол (9:1) [4]; 2) Гексан — эфир — уксусная кислота (90:10:1) [5].
Б. Для полярных липидов (фосфолипидов): 1) хлороформ — ацетон — метанол — уксусная кислота — вода (6:8:2:2:1), кислый; 2) хлороформ — мета-
нол — 26% аммиак (65:25:5), основной; 3) хлороформ — метанол — вода (65:25:4), нейтральный.
При определении качественного состава фосфолипидов их идентификация проводилась с использованием различных проявителей (пары йода, нингидрин, реактив Драгендорфа, серная кислота) и с помощью Rf стандартов.
Вышеперечисленный набор систем и реактивов позволил исчерпывающе провести анализ липидных фракций, выделенных из образцов чины.
Для изучения флавоноидного состава с учетом фаз вегетации были выбраны следующие образцы: I (фаза цветения); IV (фаза цветения); III (сочевичник) фаза бутонизации; II (фаза цветения); II (фаза плодоношения); II (фаза вегетации до цветения).
Выделение флавоноидов из сухого сырья проводилось по методике, обеспечивающей их исчерпывающую экстракцию.
С этой целью, 1 г измельченной травы помещали в колбу с обратным холодильником, заливали 20 мл 70 % этанолом и кипятили в течение 20 мин на водяной бане. Экстракт охлаждали, фильтровали через стеклянный фильтр Шотта и упаривали досуха на роторном испарителе. Остаток растворяли в спирте этиловом до конечной концентрации вещества 10 мг/мл. Определение суммарного содержания флавоноидов проводилось с использованием рутина в качестве стандарта. Результаты этого исследования приведены в табл. 3.
Определение качественного состава флавоноидов проводилось методом ТСХ на пластинках Кизельгель 60(254) фирмы Мерк, в системе растворителей н-бутанол — уксусная кислота — вода (6:1:2). Обнаружитель — серная кислота при УФ (254 нм) — пятна флавоноидов сиреневого цвета на зеленом фоне.
Таблица 1
Суммарное содержание флавоноидов в сырье (трава) различных видов чины (в %, в пересчете на абсолютно сухую массу)
| № п\п | Вид чины | Содержание суммы флавоноидов (%) |
| 1 |
I, фаза цветения | 4,51 |
| 2 |
IV, фаза цветения | 1,23 |
| 3 |
III, (сочевичник), фаза бутонизации | 0,28 |
| 4 |
II, фаза цветения | 3,56 |
| 5 |
II, фаза плодоношения | 1,50 |
| 6 |
II, фаза вегетации. До цветения | 1,25 |
Смотрите также
Исследование каталитических свойств полимерных комплексов
В последнее время наиболее интенсивно развиваются области исследований на
стыке различных направлений, например, катализ полимерами, возникший благодаря
взаимодействию таких разделов химии, ...
Абсорбция углекислого газа водой
Исходные данные для расчета абсорбционной
установки:
Шифр по Иоффе –
4;
Тип насадки –
ситчатые тарелки;
Поглощаемое
вещество – диоксид углерода (СО2);
Количество газовой
с ...
Истории Русского химического общества
Для
решения многих задач можно использовать одну из важнейших отраслей науки и
естествознания - химическую науку. Современная химия развивается стремительными
темпами, плодотворно сотруднич ...
