Общий вид денситограмм, полученных при скани­ровании, представлен на рис. 1.

Сравнение хроматограмм сапонинов, выделенных из таблеток "Сапарал" (рис. 1, а) и "Настойки аралии" (рис. 1,6) позволяет отметить различное соотношение 44

аралозидов А, В и С, входящих в состав этих лекарст­венных форм. Подобное непостоянство соотношения индивидуальных сапонинов в сырье в зависимости oт условий произрастания растения отмечалось и ранее. Соотношение сапонинов в готовых лекарственных формах легко оценить при помощи полученных денси­тограмм. Поскольку на хроматограмме обнаруживает­ся 3 зоны, соответствующие сапонинам, а на денситограмме, соответственно, три пика, при построении градуировочной зависимости площади всех пиков суммировали. Ошибка в этом случае была ниже, чем при проведении расчетов по параметрам пика одного из компонентов, учитывая непостоянство их соотношения (рис. 2).

Рис. I. Денситограммы, полученные при сканировании ТСХ-пластин: а — сапонины аралии, выделенные из таблеток “Сапарал”; 6 — сапонины настойки аралии; в — сапонины сахарной свеклы. Суммарное содержание сапонинов в пробе — 5 мкг. А, В, С— пики сапонинов; 0 — линия старта; f— линия фронта.

Рис. 2. Градуировочная зависимость суммы площадей пикон сапонинов на хроматограмме от их содержания в пробе. / — са­понины аралии; 2 — сапонины сахарной свеклы. По оси абцисс — солержание сапонинов в пробе (мкг), по оси ординат —сум­ма площадей пиков (см2).

Градуировочную зависимость суммы площадей пи­ков на денситограмме от содержания вещества в пробе получали хроматографированием серии стандартных растворов с известным содержанием сапонинов. Ис­ходный раствор готовили растворением в 80 % этано­ле точной навески сапонинов, высушенной до посто­янной массы. Серию рабочих растворов готовили по­следовательным разбавлением исходного 80% этанолом. Содержание сапонинов в них составляло 0,04 - 2,0 мг/мл (0,2 - 10 мкг в пробе при объеме про­бы 5 мкл). Этот концентрационный диапазон можно считать оптимальным при сканировании. Минималь­ное содержание сапонинов, определяемое этим мето­дом, составляет 0,2 мкг/пробе. Относительное стан­дартное отклонение в этом случае не превышает 0,03.

Полученные градуировочные зависимости имеют нелинейный характер, что полностью согласуется с те­орией Кубелки - Мунка, учитывающей поглощение и рассеивание света сорбентом. В узком диапазоне малых концентраций зависимости можно рассматри­вать как линейные (0,2 - 2,0 мкг/пробе). Нелинейная часть кривых может быть линеаризована переводом количества вещества в пробе и площади пика в обратные величины и приобретает вид, представлен­ный на рис. 3.

Рис. 3. Зависимость обратной величины суммы площадей пи­ков сапонинов на хроматограмме (1/S • 10-1) от их обратной величины содержания в пробе (1/m - 10-1). 1 —сапонины ара­лии; 2 — сапонины сахарной свеклы.

При помощи полученной градуировочной зависи­мости определяли содержание сапонинов в настойке аралии. 5мл настойки разбавляли 70% этанолом в мерной колбе емкостью 25 мл. 5 мкл полученного рас­твора наносили на стартовую линию пластаны ''Арм­сорб". В соседнюю точку наносили 5 мкл стандартно­го раствора аралозидов с концентрацией I мг/мл (5 мкг в пробе). Пластинки обрабатывали, как описано выше.