Лазерная десорбция/ионизация при помощи матрицы (MALDI)Периодическая система / Масс-спектрометрический метод анализа / Лазерная десорбция/ионизация при помощи матрицы (MALDI)Страница 2
· отобрать пипеткой 0.5 мкл образца на подложку;
· отобрать пипеткой 0.5 мкл матрицы на подложку;
· перемешать образец и матрицу втягиванием их в пипетку и выпусканием;
· позволить высохнуть на воздухе.
§ Для пептидов, небольших белков и большинства других соединений: насыщенный раствор α-циано-4-гидроксикоричной кислоты в 50:50 ацетонитрил:вода с 0.1% ТФА.
§ Для белков и других тяжёлых молекул: насыщенный раствор синапиновой кислоты в 50:50 ацетонитрил:вода с добавлением 0.1% ТФА.
§ Для гликопептидов/белков и маленьких соединений: насыщенный раствор 2,5-дигидроксибензойной кислоты (DHB) в 50:50 ацетонитрил:вода.
Рис. 1.15.
Обычно используемые в MALDI матрицы и подложка для MALDI с показанным расположением матрицы. Одним из преимуществ MALDI является то, что множество образцов может быть подготовлено в одно и то же время, как видно по этой многообразцовой подложке.
Также образцы могут быть приготовлены последовательным способом. В тонкослойном методе сначала на цель наносится гомогенная «плёнка» матрицы, а затем туда добавляется образец, который абсорбируется ей. Этот метод даёт хорошую чувствительность, разрешающую способность и точность определения. Аналогично, в толстослойном методе нитроцеллюлоза (NC) используется как добавка к матрице. После образования единого слоя NC-матрица на цели добавляется образец. Этот метод приготовления предотвращает образования щелочных аддуктов и значительно увеличивает чувствительность определения, особенно для пептидов и белков, экстрагированных из гелей. Сэндвичевый метод – другой вариант в этой категории. Тонкий слой кристаллов матрицы приготовляется как в тонкослойном методе, затем последовательно добавляются капли (a) водного 0.1% ТФА, (b) образца и (c) матрицы.
Смотрите также
Химические свойства лантана
...
Классификация дисперсных систем по агрегатному состоянию. Особенности каждой системы
...
Абсорбционная установка непрерывного действия для поглощения аммиака
Попытки
синтеза аммиака из азота и водорода предпринимались многими учеными, начиная с
конца XVI вв., после того, как в 1784 г. крупнейший французский ученый
К. Бертолле уста ...