Виды хроматографии
Статьи / Теория хроматографии, хроматографический анализ, виды хроматографии / Виды хроматографии
Страница 2

Для проведения газовой хроматографии используют газовые хроматографы различных моделей.

Жидкостная хроматография может проводиться в колоночном и плоскостном вариантах. По механизму разделения жидко-твердую хроматографию называют также жидкостной адсорбционной, а жидкость-жидкостную - просто распределительной.

В колоночной жидкостной адсорбционной хроматографии в качестве НФ применяют поверхностно-пористые адсорбенты (ППА). ППА - это твердые сферические зерна (например, стеклянные шарики), на поверхность которых наносят силикагель, оксид алюминия или некоторые полимеры, обеспечивающие слой с высокой пористостью толщиной около 1 мкм. ПФ - это растворитель, который должен хорошо растворять все компоненты анализируемой смеси, быть химически инертным по отношению к ним, адсорбенту и кислороду воздуха, быть маловязким. Как и в газовой хроматографии, анализ проводят по времени удерживания и площади пика. При этом детектироваться может разность показателей преломления между чистым растворителем и раствором после прохождения через колонку (рефрактометрический детектор) или разность в светопоглощении в видимой (фотометрический детектор), УФ - или ИК - лучах.

В колоночном варианте распределительной хроматографии ПФ служит органический растворитель, не смешивающийся с НФ. НФ обычно служит вода, адсорбированная на твердом носителе. В качестве носителей чаще используют силикагель (твердая кремниевая кислота), целлюлозу, крахмал и другие вещества, хорошо удерживающие молекулы воды на своей поверхности.

Эффективность колонки связана с вязкостью, коэффициентом диффузии и другими физическими свойствами жидкостей. Хроматографирование на колонке особо вязких жидкостей - длительный процесс, поскольку их продвижение через пористый носитель под действием силы тяжести очень мало. Для ускорения процесса хроматографирование проводят под давлением, создаваемsv насосом высокого давления. Применение давления сделало метод более динамичным и эффективным, что и отразилось в его названии - высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ).

Плоскостным вариантом жидкостной адсорбционной хроматографии является тонкослойная хроматография (ТСХ), а жидкость-жидкостной - бумажная (БХ). ТСХ и БХ очень близки по технике выполнения. НФ (силикагель, крахмал, целлюлоза, Al2O3 и др.) в ТСХ наносится тонким слоем на стеклянную, металлическую (алюминиевую фольгу) или пластиковую пластинку, а в БХ в качестве НФ обычно служит вода, адсорбированная на твердом носителе - специальной хроматографической бумаге.

Для проведения анализа каплю анализируемой смеси наносят на стартовую линию в 2 .3 см от края пластинки или полоски бумаги и высушивают. Затем край носителя погружают в растворитель (вода, органический растворитель), который действует как ПФ. При этом растворитель не должен касаться нанесенного пятна. Носитель можно подвесить так, чтобы поток растворителя двигался сверху вниз (нисходящая хроматограмма) и наоборот (восходящая) или от центра к краям (радиальная).

Рис. 1. Способ обработки бумажной хроматографии.

Под действием капиллярных сил растворитель движется вдоль слоя сорбента и с разной скоростью переносит компоненты смеси, что приводит к их пространственному разделению. Когда фронт растворителя достигнет требуемого уровня, хроматограмму вынимают из растворителя, дают ему испариться, затем проводят проявление пятен распределившихся веществ путем опрыскивания хроматограммы реагентом с помощью пульверизатора и последующего облучения УФ-лампой. В химических методах проявления в реагент добавляют реактивы, дающие с анализируемыми веществами окрашенные соединения. В физических методах используют, например, способность некоторых веществ флуоресцировать под действием УФ - лучей, для чего в проявитель добавляют флуоресцирующий индикатор. На проявленной хроматограмме обычно измеряют расстояния, пройденные растворителем L и компонентом l за определенное время и находят величину R= l/L (рис. 1). При качественном анализе применяют метод “свидетелей”, для чего на линию старта рядом с анализируемой смесью наносят индивидуальные вещества. Сравнивая значения R индивидуальных веществ и компонентов смеси, проводят их отождествление.

Для количественного анализа измеряют обычно площади зон компонентов на хроматограмме (например, с помощью миллиметровой кальки или др.) и по заранее полученному градуировочному графику зависимости S = f(n) находят количество веществ. Но применяют и другие варианты, например, выпаривают или удаляют вещества с носителя и затем определяют их количества в объеме полученного раствора.

Страницы: 1 2 3 4

Смотрите также

Качественное определение урана и тория в твердых материалах
Цель работы   1.Освоить методику качественного определения урана и тория в рудах, концентратах 2.Определить, присутствует или нет уран и торий в пробах руды ...

Синтез слабосшитого полиэлектролита ацетоуксусный эфиракриловая кислота и взаимодействие его с ионами переходных металлов
...

Калифорний (Californium), Cf
Получен искусственно в 1950 группой Сиборга в Калифорнийском университете в Беркли. Назван в честь Калифорнийского университета в Беркли, где и был получен. Как писали авторы, этим названием они хотел ...