1) методом абсолютной калибровки, т.е. по градуировочному графику зависимости типа S или h от содержания (в г) i-того компонента;

2) методом внутреннего стандарта, когда в анализируемую смесь неизвестного количественного состава вводят известное количество не содержащегося в ней вещества - внутреннего стандарта. Внутренний стандарт должен быть инертен к компонентам исследуемой смеси, а его физико-химические свойства должны быть близки им.

Содержание i-того компонента смеси (в %) находят по формуле

или ,

где r - отношение массы внутреннего стандарта к массе анализируемого вещества;

методом нормировки, заключающимся в том, что сумму площадей (высот) всех пиков на хроматограмме смеси принимают за 100%.

Содержание i-того компонента находят по формуле

или .

В процессе движения по колонке зона вещества вследствие диффузии размывается, что сказывается на ширине пиков. Ширина пиков W равна основанию треугольника, образованного касательными к левой и правой ветвям пика. Ширина пиков определяется эффективностью хроматографической системы. В качестве меры размывания зоны используют параметр, имеющий размерность длины и называемый “высота, эквивалентная теоретической тарелке” (ВЭТТ),H: H= ,

где L - длина колонки; W - ширина пика.

При расчете Н значения W и tr необходимо брать одной размерности или в сек, или в мм.

В хроматографии, как и в дистилляции, используют параметр - число теоретических тарелок:

N = = 16 .

Чем меньше ВЭТТ, тем уже пик, тем эффективнее система, тем большее количество компонентов можно разделить на колонке. Полнота разделения и правильность определения зависят от того, насколько отделены пики друг от друга. Желательно, чтобы они не перекрывались, в то же время расстояние между ними не должно быть очень большим, так как это замедляет анализ. Для характеристики полноты разделения пиков служит величина, называемая разрешением:

или при WAWB RS = .

При RS < 0,8 разрешение пиков как правило неудовлетворительное, при RS = 1 перекрывание составляет около 2% и лишь при RS=1,5 можно считать, что оба вещества разделены полностью. Значение RS=1,5 является оптимальным для симметричных пиков. Если пики асимметричны, то оптимальное значение RS должно быть больше 1,5. Для расчета RS по хроматограмме необходимо графически определить ряд параметров (рис. 2.6. 7).